（1）眼前段適應症：
①軟性白內障：玻璃體切割機能較徹底清除晶體皮質，使瞳孔領完全透明，而不出現後發障。
②瞳孔膜：各種原因引起的瞳孔膜均可切除。
③眼前段穿孔傷：眼前段穿孔傷合並外傷性白內障，尤其有玻璃體脫出時，在縫合傷口後，立即作晶體及前玻璃體切除，能提高視力，減少後發障及眼內機化膜。
④晶體脫位於前房：晶體如無硬核可預切除。
⑤玻璃體角膜接觸綜合征：白內障手術時，若玻璃體經瞳孔進入前房與角膜內皮接觸時，可使角膜內皮功能失代償。因此進入前房的玻璃體應全部切除。
⑥惡性青光眼：切除前部玻璃體皮質，解除房水向前引流阻滯，使高眼壓得到控制。
（2）眼後段適應症：
①玻璃體出血：是玻璃體切割術的一個主要適應症。玻璃體出血後經保守治療3-6個月不吸收時，應作玻璃體切割。但一旦觀察到視網膜脫離時應及時手術。兒童為防止弱視，一般宜盡早手術。外傷性玻璃體出血手術可提早。
②眼內異物：玻璃體切割手術取異物是在直視下進行，尤其對非磁性異物，或伴有其它眼組織損傷時，便於一同處理。
③眼內容炎：手術可清除細菌及其毒素，清除壞死組織及炎症物質，並可直接向玻璃體腔內注入藥物。
④視網膜脫離：合並玻璃體混濁，巨大裂孔合並增殖性玻璃體視網膜病變，黃斑裂孔，玻璃體增殖引起的牽引性網膜脫離，糖尿病性視網膜病變引起的網膜脫離等情況，適合作玻璃體切割術。一些復發性網膜脫離也可選擇玻璃體切割術。
⑤其它：晶體脫位到玻璃體；白內障手術時有碎片落入玻璃體內；黃斑皺褶、黃斑前膜及黃斑干孔；玻璃體內豬囊尾蚴等疾病，也是玻璃體切割適應症。