目前對視網膜母細胞瘤尚無有效的預防措施。但加強對經治療的患者及有高發風險的家庭定期隨訪觀察是一個積極的預防措施。
患兒的直系親屬至少作一次眼科檢查。家中的其他幼兒應接受視網膜母細胞瘤的檢查;成人需接受視網膜細胞瘤檢查，這是一種相同基因引起的非惡性腫瘤。對沒有證據顯示患了癌症的直系親屬，可分析他們的脫氧核糖核酸（DNA），以了解他們是否帶有視網膜母細胞瘤的基因。
現在可采取的另一個積極措施是開展遺傳咨詢及產前診斷來減少患兒的出生。
1.隨訪：對每一例視網膜母細胞瘤患者，在經治療後，應根據其臨床、病理所見及Rb基因突變特點（遺傳型或非遺傳型）制定出一份隨訪觀察計劃。對高危家庭出生的每一個嬰兒亦應定期作全身麻醉下眼底檢查。如果有條件，可以考慮《1歲，每3個月1次;《2歲，每4個月1次;3～5歲，每6個月1次;6～7歲每4年1次共15次。
2.遺傳咨詢：如何預測患者後代或其雙親再育子女罹患的風險，是減少視網膜母細胞瘤患兒出生及指導隨訪的一個重要問題。遺傳咨詢是達到這個目的的重要措施。目前可以在兩個水平上開展視網膜母細胞瘤的遺傳咨詢。
（1）以家系為基礎的遺傳咨詢：按視網膜母細胞瘤80%～90%的外顯率計算。
（2）通過對Rb基因突變的檢測來進行遺傳咨詢：DNA樣本可取自外周血白細胞和視網膜母細胞瘤瘤組織。多種基因突變檢測技術如Southern雜交、SSCP、DGGE等，基因劑量檢測技術如定量PCR，直接DNA測序均可應用。由於費用、時間的限制臨床上不可能對Rb基因全長180kb的序列進行全部檢測，一般集中在27個外顯子和外顯子附近0～20bp的內含子序列上（共約4kb）。Rb基因突變類型可是整個基因的缺失，也可小至點突變。
一般可在瘤組織中發現兩個突變（可相同也可不同），如果在外周血白細胞中也存在其中的一個突變則可判斷為遺傳型視網膜母細胞瘤，如果在外周血白細胞中不存在突變則可判斷為非遺傳型視網膜母細胞瘤。對遺傳型視網膜母細胞瘤患者的親戚可采血檢查是否有相同的Rb基因突變，若有此突變則其本人及子女有90%患病的風險，若無則風險較低。在用DNA檢查進行遺傳咨詢時要注意嵌合（mosaic）和低外顯率（low penetrance）現象。
3.產前診斷 ：Rb基因突變檢測已成功應用於臨床產前診斷。對於遺傳型視網膜母細胞瘤家族的胎兒可於妊娠28～30周取羊水細胞作Rb基因突變檢測，若存在該家族的Rb基因突變，最好終止妊娠;若胎兒父母不願終止妊娠，可於妊娠33～35周行經陰道的B超檢查，每周1～2次，觀察胎兒眼內是否形成腫瘤，若腫瘤已形成可在妊娠35周引產，立即對腫瘤進行激光治療。有報告經上述妊娠35周引產及激光治療的視網膜母細胞瘤，最終不僅保留了眼球，也保留了良好的視力。